PODSTAWOWE INFORMACJE
- TYTUŁ Analiza ilościowa LC-MS/MS
- KATEGORIA Szkolenie LC-MS/MS
- LOKALIZACJA Łódź
- CZAS SZKOLENIA 3 dni
- LICZBA UCZESTNIKÓW do 5 osób
- APARATURA SCIEX QTRAP LC-MS/MS
OPIS SZKOLENIA
Analiza ilościowa LC-MS/MS – szkolenie jest przeznaczone dla pracowników laboratoriów wykorzystujących systemy LC-MS/MS do analiz ilościowych. W trakcie szkolenia poruszane są następujące zagadnienia:
- Kalibracja spektrometru typu potrójny kwadrupol
- Tworzenie i optymalizacja par MRM
- Optymalizacja parametrów źródła jonów
- Optymalizacja parametrów chromatograficznych
- Przygotowanie próbki na przykładzie krwi pobranej na próbniki Mitra® (VAMS)
- Efekt matrycowy, standardy wewnętrzne (ISTD), krzywe matrycowe
- Walidacja metody ilościowej
- Raportowanie wyników
Celem szkolenia jest przedstawienie użytkownikom procedur oraz możliwości systemu LC-MS/MS i oprogramowania do uzyskania czułości, selektywności, precyzji i powtarzalności w analizach ilościowych przy jednoczesnym możliwie jak najszerszym szerokim zakresie liniowym stężeń.
Program szkolenia
Część teoretyczna:
- Budowa potrójnego kwadrupola, jonizacja, skanowanie MRM i sMRM, chromatografia, multimetody
Część praktyczna:
- Kalibracja Q1/Q3 (10 Da/s), MS/MS – rozdzielczość, m/z, intensywność.
- Tworzenie i optymalizacja par MRM (manualna, semi-automatyczna, automatyczna)
- Optymalizacja źródła jonów – T-concector oraz FIA
- Gradient vs izokrat, dozowanie, dobór kolumny, dobór temperatury, inne ważne parametry
- Stworzenie i optymalizacja metody LC-MS/MS.
- Jak dbać o czystość MS – programowanie czasu jonizacji, zawór wielodrożny, czyszczenie źródła jonów i frontu urządzenia
Przygotowanie próbek w czystym rozpuszczalniku (krzywa wzorcowa, QC, solvent, solvent+ISTD, próby badane), sekwencja analiz na noc.
Cześć praktyczna – przygotowanie prób krwi pełnej (Mitra®):
- Przygotowanie krzywych wzorcowych matrycowych
- Przygotowanie prób kontroli jakości (QC) w trzech stężeniach
- Przygotowanie prób ślepych (bez ISTD oraz z ISTD).
- Przygotowanie prób do wyznaczenia odzysku („pre-spiked” i „post-spiked”)
- Przygotowanie prób badanych
Cześć teoretyczna:
- Próbki w matrycy – omówienie efektu matrycowego i sposobów jego niwelowania.
- Optymalizacja metody przygotowania próbki i metody LC-MS/MS
Cześć praktyczna:
- Ekstrakcja prób z próbników Mitra® do analizy LC-MS/MS.
- Sekwencja analiz przygotowanych prób na noc
Cześć teoretyczna:
- Walidacja metody ilościowej LC-MS/MS
Część praktyczna:
- Oprogramowanie – algorytmu integracji danych, wygładzanie sygnału, ważenie.
- Krzywe matrycowe vs krzywe w rozpuszczalniku, wpływ ISTD (Sciex OS)
- Walidacja metody – kryteria walidacji, wyznaczenie LOD, LLOQ, ULOQ, liniowość, zakres roboczy metody, powtarzalność, odzysk.
- Sporządzenie skróconych raportów walidacyjnych
- Raportowanie wyników z prób badanych – raport vs eksport danych do Excel.
- Podsumowanie i dyskusja.
ZOBACZ TAKŻE:
