PODSTAWOWE INFORMACJE
- TYTUŁ Podstawowe szkolenie LC-MS/MS
- KATEGORIA Szkolenie LC-MS/MS
- LOKALIZACJA Łódź
- CZAS SZKOLENIA 3 dni
- LICZBA UCZESTNIKÓW do 5 osób
- APARATURA SCIEX QTRAP & QTOF LC-MS/MS
OPIS SZKOLENIA
Podstawowe szkolenie LC-MS/MS obejmuje podstawy teoretyczne spektrometrii mas oraz zapoznanie z podstawową obsługą urządzenia. Podstawowe szkolenie LC-MS/MS jest skierowane przede wszystkim do osób rozpoczynających pracę na urządzeniach LC-MS/MS lub pragnących zapoznać się z tą techniką analityczną. W czasie szkolenia przedstawione zostaną:
- zasady tworzenia oraz optymalizacji metod ilościowych oraz jakościowych na urządzeniach niskiej (potrójny kwadrupol, QTRAP) i wysokiej rozdzielczości (QTOF),
- podstawowe funkcjonalności oprogramowania,
- procedury i cele kalibracji urządzenia,
- zasady utrzymania czystości pracy spektrometru mas.
Podstawowe szkolenie LC-MS/MS - program
Zajęcia teoretyczne:
- Wprowadzenie do LC
- Wstęp do spektrometrii mas (podstawy)
- Analiza ilościowa.
Część praktyczna:
QTRAP:
- tryby skanowania QTRAP na urządzeniu – Q1, , MS2, MRM, pokazanie i omówienie na przykładzie wybranego pestycydu widma fragmentacyjnego i jego szlaku fragmentacji.
- tworzenie par MRM (manualnie, semi-automatycznie, automatycznie).
- optymalizacja parametrów źródła jonów –T-conector
- wyjaśnienie głównych parametrów związanych z LC (dobór kolumny, gradient vs izokrat, autosampler)
- ustawienie i optymalizacja metody LC-MS/MS
QTOF:
- manualna i automatyczna optymalizacja MRMHR
- parametry źródła jonów i LC (transfer z metody opracowanej powyżej)
Sekwencja analiz ilościowych na obydwu urządzeniach.
Analiza ilościowa:
- obróbka i analiza danych,
- raportowanie – Sciex OS (QTRAP, QTOF).
- omówienie rodzajów algorytmów integracji (MQ4, autopeak) oraz parametrów integracji.
- samodzielne dobranie parametrów integracji i wykreślenie krzywych wzorcowych.
- samodzielna analiza danych i generowanie raport z analiz.
Analiza jakościowa:
Wstęp teoretyczny – wprowadzenie do analizy jakościowej:
- tryby qwadrupolowe (Prec/NL),
- tryby pułapkowe (EMS, EPI, MS3),
- tryby QTOF (TOF MS, TOF MS/MS)
- metody mieszane,
- analiza celowana vs niecelowana,
- DDA (IDA) – omówienie tworzenia metod,
Część praktyczna:
- stworzenie metod jakościowych na QTRAP (Prec-IDA, MRM-IDA), pozostałe parametry (LC, źródło jonów) jak w dniu poprzednim,
- LightSight – omówienie działania, stworzenie multimetody MRM-IDA dla wybranego pestycydu i analiza próbek (noc).
- QTOF – stworzenie metody IDA, pozostałe parametry (LC, źródło jonów) jak w dniu poprzednim.
Sekwencja analiz jakościowych na noc.
Analiza danych jakościowych:
QTRAP:
- omówienie wyników Prec-IDA, MRM-IDA – co widzimy w różnych typach skanowania MS i MS/MS. Manualny przegląd danych oraz poprzez IDA Explorer (SciexOS).
- Analiza wyników w LightSight, porównanie np. z Prec-IDA – zalety/wady
QTOF:
- poszukiwanie potencjalnie obecnych w próbie związków,
- manualne porównanie próbek blank vs próba badana,
- manualnie poprzez ekstrakcję XIC (po wzorze sumarycznym),
- Formula finder – wyprowadzenie wzory sumarycznego na danych TOF MS i weryfikacja fragmentacji na danych TOF MS/MS
- przeszukiwanie w trybie IDA Explorer – zastosowanie filtrów: podobieństwa, rozkładu izotopowego, defektu masy,
- przeszukiwanie baz danych,
- Molecule Profiler – pokazanie możliwości oprogramowania na wybranym przykładzie pestycydu,
Kalibracja urządzeń:
- rozdzielczość, stosunek masy do ładunku, intensywność,
- Q1 i Q3, LIT (MS i MS/MS), TOF MS i TOF-MS/MS
- automatyka vs manualna kalibracja,
Przykłady zastosowania LC-MS/MS
Podsumowanie
Dyskusja
ZOBACZ TAKŻE:
