Analiza ilościowa LC-MS/MS

PODSTAWOWE INFORMACJE


  • TYTUŁ Analiza ilościowa LC-MS/MS
  • KATEGORIA Szkolenie LC-MS/MS
  • LOKALIZACJA Łódź
  • CZAS SZKOLENIA 3 dni
  • LICZBA UCZESTNIKÓW do 5 osób
  • APARATURA SCIEX QTRAP LC-MS/MS

OPIS SZKOLENIA

Analiza ilościowa LC-MS/MS – szkolenie jest przeznaczone dla pracowników laboratoriów wykorzystujących systemy LC-MS/MS do analiz ilościowych. W trakcie szkolenia poruszane są następujące zagadnienia:

  • Kalibracja spektrometru typu potrójny kwadrupol
  • Tworzenie i optymalizacja par MRM
  • Optymalizacja parametrów źródła jonów
  • Optymalizacja parametrów chromatograficznych
  • Przygotowanie próbki na przykładzie krwi pobranej na próbniki Mitra® (VAMS)
  • Efekt matrycowy, standardy wewnętrzne (ISTD), krzywe matrycowe
  • Walidacja metody ilościowej
  • Raportowanie wyników

Celem szkolenia jest przedstawienie użytkownikom procedur oraz możliwości systemu LC-MS/MS i oprogramowania do uzyskania czułości, selektywności, precyzji i powtarzalności w analizach ilościowych przy jednoczesnym możliwie jak najszerszym szerokim zakresie liniowym stężeń.

Program szkolenia

Część teoretyczna:

  • Budowa potrójnego kwadrupola, jonizacja, skanowanie MRM i sMRM, chromatografia, multimetody

Część praktyczna:

  • Kalibracja Q1/Q3 (10 Da/s), MS/MS – rozdzielczość, m/z, intensywność.
  • Tworzenie i optymalizacja par MRM (manualna, semi-automatyczna, automatyczna)
  • Optymalizacja źródła jonów – T-concector oraz FIA
  • Gradient vs izokrat, dozowanie, dobór kolumny, dobór temperatury, inne ważne parametry
  • Stworzenie i optymalizacja metody LC-MS/MS.
  • Jak dbać o czystość MS – programowanie czasu jonizacji, zawór wielodrożny, czyszczenie źródła jonów i frontu urządzenia

Przygotowanie próbek w czystym rozpuszczalniku (krzywa wzorcowa, QC, solvent, solvent+ISTD, próby badane), sekwencja analiz na noc.

Cześć praktyczna – przygotowanie prób krwi pełnej (Mitra®):

  • Przygotowanie krzywych wzorcowych matrycowych
  • Przygotowanie prób kontroli jakości (QC) w trzech stężeniach
  • Przygotowanie prób ślepych (bez ISTD oraz z ISTD).
  • Przygotowanie prób do wyznaczenia odzysku („pre-spiked” i „post-spiked”)
  • Przygotowanie prób badanych

Cześć teoretyczna:

  • Próbki w matrycy – omówienie efektu matrycowego i sposobów jego niwelowania.
  • Optymalizacja metody przygotowania próbki i metody LC-MS/MS

Cześć praktyczna:

  • Ekstrakcja prób z próbników Mitra® do analizy LC-MS/MS.
  • Sekwencja analiz przygotowanych prób na noc

Cześć teoretyczna:

  • Walidacja metody ilościowej LC-MS/MS

Część praktyczna:

  • Oprogramowanie – algorytmu integracji danych, wygładzanie sygnału, ważenie.
  • Krzywe matrycowe vs krzywe w rozpuszczalniku, wpływ ISTD (Sciex OS)
  • Walidacja metody – kryteria walidacji, wyznaczenie LOD, LLOQ, ULOQ, liniowość, zakres roboczy metody, powtarzalność, odzysk.
  • Sporządzenie skróconych raportów walidacyjnych
  • Raportowanie wyników z prób badanych – raport vs eksport danych do Excel.
  • Podsumowanie i dyskusja.

Jeżeli jesteś zainteresowany udziałem w szkoleniu – skontaktuj się z nami.