Podstawowe szkolenie LC-MS/MS

PODSTAWOWE INFORMACJE


  • TYTUŁ Podstawowe szkolenie LC-MS/MS
  • KATEGORIA Szkolenie LC-MS/MS
  • LOKALIZACJA Łódź
  • CZAS SZKOLENIA 3 dni
  • LICZBA UCZESTNIKÓW do 5 osób
  • APARATURA SCIEX QTRAP & QTOF LC-MS/MS

OPIS SZKOLENIA

Podstawowe szkolenie LC-MS/MS obejmuje podstawy teoretyczne spektrometrii mas oraz zapoznanie z podstawową obsługą urządzenia. Podstawowe szkolenie LC-MS/MS jest skierowane przede wszystkim do osób rozpoczynających pracę na urządzeniach LC-MS/MS lub pragnących zapoznać się z tą techniką analityczną. W czasie szkolenia przedstawione zostaną:

  • zasady tworzenia oraz optymalizacji metod ilościowych oraz jakościowych na urządzeniach niskiej (potrójny kwadrupol, QTRAP) i wysokiej rozdzielczości (QTOF),
  • podstawowe funkcjonalności oprogramowania,
  • procedury i cele kalibracji urządzenia,
  • zasady utrzymania czystości pracy spektrometru mas.

Podstawowe szkolenie LC-MS/MS - program

Zajęcia teoretyczne:

  • Wprowadzenie do LC
  • Wstęp do spektrometrii mas (podstawy)
  • Analiza ilościowa.

Część praktyczna:

QTRAP:

  • tryby skanowania QTRAP na urządzeniu – Q1, , MS2, MRM, pokazanie i omówienie na przykładzie wybranego pestycydu widma fragmentacyjnego i jego szlaku fragmentacji.
  • tworzenie par MRM (manualnie, semi-automatycznie, automatycznie).
  • optymalizacja parametrów źródła jonów –T-conector
  • wyjaśnienie głównych parametrów związanych z LC (dobór kolumny, gradient vs izokrat, autosampler)
  • ustawienie i optymalizacja metody LC-MS/MS

QTOF:

  • manualna i automatyczna optymalizacja MRMHR
  • parametry źródła jonów i LC (transfer z metody opracowanej powyżej)

Sekwencja analiz ilościowych na obydwu urządzeniach.

Analiza ilościowa:

  • obróbka i analiza danych,
  • raportowanie – Sciex OS (QTRAP, QTOF).
  • omówienie rodzajów algorytmów integracji (MQ4, autopeak) oraz parametrów integracji.
  • samodzielne dobranie parametrów integracji i wykreślenie krzywych wzorcowych.
  • samodzielna analiza danych i generowanie raport z analiz.

Analiza jakościowa:

Wstęp teoretyczny – wprowadzenie do analizy jakościowej:

  • tryby qwadrupolowe (Prec/NL),
  • tryby pułapkowe (EMS, EPI, MS3),
  • tryby QTOF (TOF MS, TOF MS/MS)
  • metody mieszane,
  • analiza celowana vs niecelowana,
  • DDA (IDA) – omówienie tworzenia metod,

Część praktyczna:

  • stworzenie metod jakościowych na QTRAP (Prec-IDA, MRM-IDA), pozostałe parametry (LC, źródło jonów) jak w dniu poprzednim,
  • LightSight – omówienie działania, stworzenie multimetody MRM-IDA dla wybranego pestycydu i analiza próbek (noc).
  • QTOF – stworzenie metody IDA, pozostałe parametry (LC, źródło jonów) jak w dniu poprzednim.

Sekwencja analiz jakościowych na noc.

Analiza danych jakościowych:

QTRAP:

  • omówienie wyników Prec-IDA, MRM-IDA – co widzimy w różnych typach skanowania MS i MS/MS. Manualny przegląd danych oraz poprzez IDA Explorer (SciexOS).
  • Analiza wyników w LightSight, porównanie np. z Prec-IDA – zalety/wady

QTOF:

  • poszukiwanie potencjalnie obecnych w próbie związków,
  • manualne porównanie próbek blank vs próba badana,
  • manualnie poprzez ekstrakcję XIC (po wzorze sumarycznym),
  • Formula finder – wyprowadzenie wzory sumarycznego na danych TOF MS i weryfikacja fragmentacji na danych TOF MS/MS
  • przeszukiwanie w trybie IDA Explorer – zastosowanie filtrów: podobieństwa, rozkładu izotopowego, defektu masy,
  • przeszukiwanie baz danych,
  • Molecule Profiler – pokazanie możliwości oprogramowania na wybranym przykładzie pestycydu,

Kalibracja urządzeń:

  • rozdzielczość, stosunek masy do ładunku, intensywność,
  • Q1 i Q3, LIT (MS i MS/MS), TOF MS i TOF-MS/MS
  • automatyka vs manualna kalibracja,

Przykłady zastosowania LC-MS/MS
Podsumowanie
Dyskusja

Jeżeli jesteś zainteresowany udziałem w szkoleniu – skontaktuj się z nami.